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https://hdl.handle.net/20.500.14094/90004186
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90004186 (fulltext)
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2.69 MB
2
メタデータ
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メタデータID
90004186
アクセス権
open access
出版タイプ
Version of Record
タイトル
Development of a comprehensive set of tools for genome engineering in a cold- and thermo-tolerant Kluyveromyces marxianus yeast strain
著者
Nambu-Nishida, Yumiko ; Nishida, Keiji ; Hasunuma, Tomohisa ; Kondo, Akihiko
著者名
Nambu-Nishida, Yumiko
著者ID
A1338
研究者ID
1000010620338
KUID
https://kuid-rm-web.ofc.kobe-u.ac.jp/search/detail?systemId=ee04637a4772fee5520e17560c007669
著者名
Nishida, Keiji
西田, 敬二
ニシダ, ケイジ
所属機関名
先端バイオ工学研究センター
著者ID
A0960
研究者ID
1000020529606
KUID
https://kuid-rm-web.ofc.kobe-u.ac.jp/search/detail?systemId=73b63639d47d0a4b520e17560c007669
著者名
Hasunuma, Tomohisa
蓮沼, 誠久
ハスヌマ, トモヒサ
所属機関名
先端バイオ工学研究センター
著者ID
A1715
研究者ID
1000040205547
KUID
https://kuid-rm-web.ofc.kobe-u.ac.jp/search/detail?systemId=a324eb4a1b052e53520e17560c007669
著者名
Kondo, Akihiko
近藤, 昭彦
コンドウ, アキヒコ
所属機関名
科学技術イノベーション研究科
収録物名
Scientific Reports
巻(号)
7
ページ
8993-8993
出版者
Nature Publishing Group
刊行日
2017-08-21
公開日
2017-09-14
抄録
Kluyveromyces marxianus, a non-conventional thermotolerant yeast, is potentially useful for production of ethanol and other products. This species has a strong tendency to randomly integrate transforming DNA fragments, making necessary the development of more precise methods for gene targeting. In this study, we first demonstrated that K. marxianus NBRC1777 is cold-tolerant, and then established a highly efficient and precise technique for gene editing by introducing genes encoding deaminase-mediated targeted point mutagenesis (Target-AID) and clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) associated proteins (CRISPR-Cas9). We used Target-AID to introduce targeted point mutations that disrupted Nej1 or Dnl4, genes that are involved in non-homologous end-joining (NHEJ). Both of the resulting mutant strains showed enhanced proportions of homology-mediated integration compared to the wild-type parent. In combination with target cleavage by CRISPR-Cas9, markerless integration was performed using short (-50 bp) flanking homologous sequences. Together, these tools render this species fully tractable for gene manipulation, permitting targeted genetic changes in the cold- and thermo-tolerant yeast K. marxianus.
カテゴリ
科学技術イノベーション研究科
先端バイオ工学研究センター
学術雑誌論文
権利
© The Author(s) 2017.
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資源タイプ
journal article
言語
English (英語)
eISSN
2045-2322
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DOI
https://doi.org/10.1038/s41598-017-08356-5
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