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https://hdl.handle.net/20.500.14094/90004826
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90004826 (fulltext)
pdf
1.44 MB
3
メタデータ
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メタデータID
90004826
アクセス権
open access
出版タイプ
Version of Record
タイトル
Genetic and physiological basis for antibody production by Kluyveromyces marxianus
著者
Nambu-Nishida, Yumiko ; Nishida, Keiji ; Hasunuma, Tomohisa ; Kondo, Akihiko
著者名
Nambu-Nishida, Yumiko
著者ID
A1338
研究者ID
1000010620338
KUID
https://kuid-rm-web.ofc.kobe-u.ac.jp/search/detail?systemId=ee04637a4772fee5520e17560c007669
著者名
Nishida, Keiji
西田, 敬二
ニシダ, ケイジ
所属機関名
先端バイオ工学研究センター
著者ID
A0960
研究者ID
1000020529606
KUID
https://kuid-rm-web.ofc.kobe-u.ac.jp/search/detail?systemId=73b63639d47d0a4b520e17560c007669
著者名
Hasunuma, Tomohisa
蓮沼, 誠久
ハスヌマ, トモヒサ
所属機関名
先端バイオ工学研究センター
著者ID
A1715
研究者ID
1000040205547
KUID
https://kuid-rm-web.ofc.kobe-u.ac.jp/search/detail?systemId=a324eb4a1b052e53520e17560c007669
著者名
Kondo, Akihiko
近藤, 昭彦
コンドウ, アキヒコ
所属機関名
科学技術イノベーション研究科
収録物名
AMB Express
巻(号)
8
ページ
56-56
出版者
BioMed Central
刊行日
2018-04-12
公開日
2018-05-02
抄録
Kluyveromyces marxianus is a thermotolerant, crabtree-negative yeast, which preferentially directs metabolism (e.g., from the tricarboxylic acid cycle) to aerobic alcoholic fermentation. Thus K. marxianus has great potential for engineering to produce various materials under aerobic cultivation conditions. In this study, we engineered K. marxianus to produce and secrete a single-chain antibody (scFv), a product that is highly valuable but has historically proven difficult to generate at large scale. scFv production was obtained with strains carrying either plasmid-borne or genomically integrated constructs using various combinations of promoters (P-MDH1 or P-ACO1) and secretion signal peptides (KmINUss or Scα-MFss). As the wild-type K. marxianus secretes endogenous inulinase predominantly, the corresponding INU1 gene was disrupted using a Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat (CRISPR)-associated protein (CRISPR-Cas9) system to re-direct resources to scFv production. Genomic integration was used to replace INU1 with sequences encoding a fusion of the INU1 signal peptide to scFv; the resulting construct yielded the highest scFv production among the strains tested. Optimization of growth conditions revealed that scFv production by this strain was enhanced by incubation at 30 °C in xylose medium containing 200 mM MgSO4. These results together demonstrate that K. marxianus has the potential to serve as a host strain for antibody production.
キーワード
Kluyveromyces marxianus
Single-chain antibody (scFv)
INU1
Inulinase
MgSO4
カテゴリ
科学技術イノベーション研究科
先端バイオ工学研究センター
学術雑誌論文
権利
© The Author(s) 2018.
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資源タイプ
journal article
言語
English (英語)
eISSN
2191-0855
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DOI
https://doi.org/10.1186/s13568-018-0588-1
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